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警惕非洲猪瘟,5981cc万洲国际提供一站式解决方案
据世界动物卫生组织(WOAH)消息,2023年2月13日,我国香港特别行政区渔农自然护理署向WOAH通报称,香港地区发生一起非洲猪瘟疫情。另外据Mysteel统计,国内也时有非洲猪瘟疫情,全国主要20个省份非瘟情况分为影响一般、影响轻微、基本无影响区。其中山西、河北、山东、辽宁属于影响一般区域,两湖两广、江西、福建、江苏、浙江8个省属于基本无影响区,黑龙江、吉林、河南、安徽、云南、四川、重庆、贵州8省属于影响轻微区。
 
进入春季,气温降低、昼夜温差大,空气干燥,非洲猪瘟病毒在环境中更易存活,猪只健康容易受影响,非洲猪瘟进入高发期。养殖场户应从消毒灭源、控制传播、疫病监测和检测、提高猪只健康水平等方面强化防控措施,降低非洲猪瘟发生风险。 
 
5981cc万洲国际作为生命科学工具供应商,长期为IVD企业提供高品质、高性价比的原料,积极协助应对非洲猪瘟疫情,可为客户提供非洲猪瘟防控通用及定制化解决方案。
 

 非洲猪瘟核酸检测流程

非洲猪瘟核酸检测流程

 

1

ASFV检测解决方案

方案一:

全自动核酸提取+高灵敏全预混qPCR

全自动、操作简便、省时稳定

Auto-Pure 32A automated nucleic acid extraction system (Cat#80501)

  • 产品特点:

全自动提取、简便省时、提取效率高、样本通量可变、兼容性广、防污染

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图1. 32A全自动核酸提取仪(Cat#80501)

 

MolPure® Mag32 Swab Viral DNA/RNA Kit FA(Cat#18301)

  • 产品特点:提取效率高、重复性好、试剂形式多样化、安全无毒

 
 

Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus)(Cat#13891)

  • 产品特点:超强全预混稳定性、高灵敏度、支持快速程序、多平台多体系适用、UDG防污染体系

 
  • 数据展示:

图片
图2.Yeasen(Cat#13891)全预混热稳定性及冻融稳定性验证

 

将Yeasen qPCR预混液(Cat#13891)配置成含引物探针的全预混液,在37℃放置16天以及冻融10次后,ASFV阳性样本稀释10倍以及最低检出限对应的稀释1000倍作为模板进行扩增,发现Ct值和荧光值无显著变化,性能稳定。

 

方案二:

核酸释放剂+耐抑制qPCR试剂

免提取直扩qPCR,操作更便捷

Nucleic Acid Release Reagent(Cat#13720)

  • 产品特点:10min快速裂解、可室温运输与保存

 
 

Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix(Cat#11211)

  • 产品特点:血液杂质耐受性强、超高灵敏度、超强存储稳定性

 

 

  • 数据展示:

图片
图3.Yeasen(Cat#11211)及各品牌同类型试剂血液杂质耐受能力

 

选择与血液保存相关的物质(EDTA、柠檬酸钠)作为杂质背景,使用Yeasen qPCR预混液(Cat#11211)及各品牌同类型试剂对模板进行扩增。结果发现,与同类产品相比, Yeasen qPCR预混液具有更强的杂质耐受能力。

图片

图4.Yeasen(Cat#11211)热稳定性验证

 

使用ASFV/ACT双质粒体系,在37℃下分别放置7天和14天后,Ct值和荧光值无显著变化,性能稳定。
 

方案三:等温扩增

简便、快速、高效

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDGplus)(Cat#13762ES)

  • 产品特点:操作简便、灵敏度高、特异性好、试剂耐受性强、超强稳定性

 
  • 数据展示:

图片
图5.Yeasen(Cat#13762)灵敏度验证
 
用Yeasen RT-LAMP试剂(Cat#13762)测试50 copies/T的RNA病毒,测试结果表明在15min内,检出率达100%;检测48孔NTC,测试结果不起峰,特异性良好。
 

Hieff® Bst Plus DNA Polymerase(Cat#14402)

  • 产品特点:反应快速、链置换活性强、灵敏度高、高dUTP耐受性

 
  • 数据展示:

图片
图6. 高dUTP耐受性验证

 

使用5981cc万洲国际Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL)进行LAMP反应,扩增DNA病毒 (50 copies/T)。在推荐反应方案中引入dUTP/UDG酶防污染系统,使用dUTP替换dTTP。对比全U(35 mM)替换(红色扩增曲线)与T:U = 1:1(蓝色扩增曲线)的扩增结果发现,在反应体系中添加dUTP对该酶的灵敏度及扩增效率无影响,该酶具有较高的dUTP耐受性。

 

 

2

ASFV检测耗材

 

 

 

3

ASFV检测实验室污染防控

DNA/RNA Remover 核酸气溶胶污染清除剂 (Cat#19702)

  • 产品特点:

方便有效:即用型喷雾剂,能去除绝大多数物体表面的核酸(DNA/RNA)污染。
适用性广:适用于PCR实验室、PCR设备及耗材等领域。
稳定性好:常温保存1年。
 
  • 数据展示:

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图片
图7.不同物体表面的清除前VS清除后的效果对比
 
在EP管(塑料)、玻璃、实验台面、金属等地方模拟核酸污染,然后使用核酸清除剂进行清洁操作。清洁前、后分别进行qPCR反应,得到qPCR扩增曲线和对应的Ct值,显示核酸清除剂处理不同物体表面均可将核酸完全清除。
 

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产品名称

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Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix

11211

Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix (UDG plus)

11212

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Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix(UDG plus)

13851/13891

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13650

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Hieff Unicon® Lyo-TaqMan Multiplex qPCR Kit

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13762

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13906

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14020

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14402

Hieff® Bst Plus DNA polymerase 

14403

检测耗材

产品

产品名称

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吸头

10μL滤芯袋装吸头

83012

200μL滤芯袋装吸头

83042

1000μL滤芯袋装吸头,蓝色

83091

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83503

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83504

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0.2ml 96孔PCR板-半裙边,透明,印刷,黑字

83552

0.1ml96孔PCR板,白色,无裙边

83553

0.1ml96孔PCR板,无色透明,无裙边

83554

0.2ml96孔PCR板,透明,无裙边

83555

qPCR压敏封板膜,内附刮板

83624

0.2ml PCR八联排+光学平盖,透明

83602

0.1ml PCR八联排+光学平盖,透明

83601

0.1ml PCR八联排,平盖,白色

83603

0.2ml PCR八联排,平盖,白色

83604

 

实验室污染清除

产品

产品名称

货号

核酸清除剂

DNA/RNA Remover

19702

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