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直接PCR是指直接从样品扩增目标DNA,无需进行核酸分离纯化。直接PCR分两类,直接法:取少量样本直接加入到PCR Master Mix中,进行PCR鉴定;裂解法:样本取样后,加入裂解液中,裂解释放基因组,取少量裂解上清液加入到PCR Master Mix中,进行PCR鉴定。这种方法简化了实验流程,减少了动手操作时间,同时可避免纯化步骤DNA的损失。>>>>>直扩PCR技术,高效锁定目标基因<<<<<

直接PCR示意图

推荐具有高合成能力的DNA聚合酶用于直接PCR扩增。细胞碎片、蛋白、脂质和多糖也随DNA释放到裂解液中,它们会抑制PCR反应。具有高合成能力的DNA聚合酶可以耐受这些抑制剂,从而使直接PCR成为可能。具有高合成能力的聚合酶通常具有更高灵敏度,因此可从未纯化样本中扩增微量的DNA。

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