Uracil DNA Glycosylase (UDG), Glycerol-Free
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UDG(尿嘧啶-DNA 糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。



产品特色

1. 去除含dU的PCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。

酶活定义

以25℃,30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位(U)。

失活方式

95℃,5-10 min。


应用案例

按下列组份配制PCR反应液:

试剂体积
10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)5 μL
25 mmol/L MgCl23 μL
dUTP0.6 mmol/L
dCTP / dGTP/ dATP0.2 mmol/L each
模板DNAOptional
引物1 (10 μmol/L)2 μL
引物2 (10 μmol/L)2 μL
Taq DNA Polymerase (5 U/μL)0.5 μL
UDG (1 U/μL)1 μL
ddH2OTo 50 μL

【注】:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mmol/L之间调整。可选择性掺入0.2 mmol/L dTTP。

2. PCR反应:

反应温度反应时间循环数目的
25℃10 min1降解含U模板
94℃2 min1UDG酶失活,模板预变性
95℃10 sec30-35变性
60℃20 sec退火
72℃30 sec/kb延伸
72℃5 min1终延伸

【注】:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。


存储条件

2~8℃保存,有效期6个月。

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