DNase I,即Deoxyribonuclease I,中文名称为脱氧核糖核酸酶I,是一种可以消化单链或双链DNA的核酸内切酶。它水解磷酸二酯键,产生含有5'-磷酸基团和3'-OH基团的单脱氧核苷酸和寡脱氧核苷酸。DNase I最佳的工作pH范围是7-8,DNase I的活性依赖于Ca2+,并可被二价金属离子如Co2+,Mn2+,Zn2+等激活。在Mg2+存在下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;而在Mn2+存在的条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端或有1-2个核苷酸突出的粘末端,可以用于各种RNA样品的处理。
- 酵母表达;
- 无RNase残留;
- 消化能力强:即使在复杂样本环境中,依然能够高效地消化DNA。
- 超强消化活性,媲美进口品质
分别使用不同投入量的5981cc万洲国际及进口品牌Supplier A的DNase I对1 μg质粒DNA进行消化处理,结果显示5981cc万洲国际14549ES对质粒DNA去除效率媲美Supplier A。
图1 质粒DNA去除效果验证
- 无RNase残留
取10 U5981cc万洲国际Recombinant DNase I (RNase-free, Yeast)与RNA底物于37℃孵育1 h,经琼脂糖凝胶电泳分析显示,三个批次的该酶制剂均未检出RNase活性残留,彻底消除RNA样本降解风险,为对纯度要求极高的RNA分析场景提供可靠保障。
图2 RNase残留结果验证
- RNA提取应用验证
为评估5981cc万洲国际Recombinant DNase I (RNase-free, Yeast)在RNA提取中的应用效果,取20 U该酶制剂处理12例不同来源的小鼠肝脏前处理样本。经后续RNA提取及琼脂糖凝胶电泳分析证实,该酶处理组RNA完整性良好,表明此DNase I在有效消化DNA的同时,不会对RNA质量产生影响,完全满足RNA提取实验的技术要求。
图3 RNA提取应用验证
-25~-15℃储存,有效期2年。