硫酸葡聚糖钠盐(Dextran sulfate,DSS)是葡聚糖的聚阴离子衍生物,由葡聚糖和氯磺酸的酯化反应形成。其中含硫量 约为17%,相当于葡聚糖分子的每个葡萄糖残糖中平均含1.9个硫酸基团。DSS具有几个特点:1)聚阴离子复合物,可溶于水,形成无色水溶液;2)纯度高,且具有良好的稳定性;3)可被自然降解。
炎症性肠炎(IBD)是一种慢性、易复发的胃肠道感染,会提升肠道肿瘤发生的危险性,主要包括UC和克罗恩病(Crohn disease, CD)。自1985年首次报道采用葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium, DSS)制备出仓鼠溃疡性结肠炎模型以来,已有大量研究证明DSS结肠炎模型与人类溃疡性结肠炎相似。DSS结肠炎模型的组织学特点、临床表现、发病部位和细胞因子增殖情况都与人类溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)极为相似。该模型的造模条件和操作方法简单,造价便宜,重复性好,便于掌握和推广;可根据实验目的调整DSS浓度和给药时间,建立急性、慢性和急慢性交替性模型。
本品属分子生物学级别产品,只用于科研,不适用于临床诊断。
【DSS结肠炎模型造模视频】
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室温运输与保存,有效期2年。
Q:结肠炎造模,每天给大鼠和小鼠饮水量体积是多少(包含急性和慢性造模)?
A:小鼠(20~25g)每只每天 7~10mL,大鼠(100 g)每只每天 10~11mL。
Q:小鼠急性和慢性造模浓度是多少?造模周期是多久?
A:急性造模:3%~5%,周期:7天左右;慢性造模:1%~3%,周期:9周左右。给药浓度和动物类型、品系、体重大小以及给药方式都有关,需要客户参考相关文献并做预实验摸索最佳浓度。
Q:3%的 DSS,小鼠饮用了三天,没有明显的体重下降现象?
A:这属于正常现象,有些动物反应较慢,甚至饮用 DSS 的第5天才出现体重下降。若是第7天还未出现明显症状,建议重新提高 DSS 浓度到 3.5%~5%。
Q:结肠要造模,如何进行灌喂造模?
A:每天分别于 10:00,14:00和18:00 给予2%的 DSS 溶液灌喂,每次30mL/kg, 不需要另外补水。每次最后以一次灌喂后给予足量混合配方颗粒饲料,次日 8:00 取走饲料。连续造模 9 天即可。 参考文献:葡聚糖硫酸钠自由饮用于定量灌喂诱导小鼠急性结肠炎模型的比较研究,胃肠病学 2009,14(1),27-30。
Q:结肠炎造模,造模失败的原因有哪些?
A:DSS造模会受到多种因素影响,包括小鼠类型、DSS分子量、DSS浓度、给药周期等。其中,DSS浓度是影响造模成功最主要的因素。失败可能的原因:DSS 浓度过低、给药时间短、小鼠未饮用到 DSS。 解决方案:1、提高 DSS 浓度(有文献报道最高可用 10% DSS 给药),2、延长给药周期,可持续给药 7-10 天,3、观察是否出现漏水、瓶口堵塞等情况。 Q:DSS为什么只有这个分子量的试剂可以造模?
A:DSS是一种常用于诱导结肠炎模型的化学物质。然而,不同分子量的DSS可能会产生不同的效果,因此只有特定分子量范围内的DSS适用于结肠炎模型。影响DSS适用性的关键因素是其溶解度和肠道渗透性。较低分子量的DSS溶解度较高,并且更容易通过肠道黏膜渗透,因此可以更好地模拟结肠炎的病理过程。较高分子量的DSS溶解度较低,并且渗透性较差,很难通过肠道黏膜进入肠壁,因此对于诱导结肠炎模型来说效果较差。因此,当选择适用于结肠炎模型的DSS时,需要考虑其分子量,以确保其溶解度和肠道渗透性与所需的病理模型相匹配。最适合结肠炎模型的DSS分子量可能因具体研究需求而不同,需要根据相关文献和实验经验来选择合适的DSS。
Q:为什么造模选择60316ES这个产品,而其他的葡聚糖硫酸钠不可以用?
A:通常肠炎造模使用的是36-50KD,小分子量的 DSS 致炎效果差,大分子量的 DSS 肠道不吸收。
Q: 从DSS诱导小鼠的粪便样本中提取DNA,结肠组织中提取的RNA中会有DSS残留,会抑制下游PCR,RT-PCR实验,如何处理?
A:精胺可以去除DSS对PCR的抑制。参考文献:Journal of Microbiological Methods ,2018 Jan, 144: 1-7。
Q:对于结肠炎造模,急性结肠炎造模,结肠没有变短,盲肠变大是什么原因呢?
A:在动物结肠炎造模的过程中,慢性结肠炎的结肠变短很明显,急性结肠炎造模的结肠不是很明显,但是会出现结肠变的比较脆,透明,充血等现象。主要看HE切片结果。急性结肠炎是结肠黏膜的急性炎症反应,盲肠变大可能是由于炎症引起的充血和水肿所致。
客户使用该产品发表的科研文献(不完全统计:部分)
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